DERIVES DE DIARYLPYRIDAZINONES, LEUR PREPARATION ET LEUR
APPLICATION EN THERAPEUTIQUE HUMAINE
La présente invention concerne des dérivés de diarylpyridazinones, leur
préparation et leurs applications en thérapeutique humaine, en tant que
bloqueurs des canaux potassiques Kv et plus particulièrement les canaux
Kv1 .5, Kv4.3 et Kv1 . 1 .
Les canaux potassiques représentent la plus grande famille des canaux
ioniques dans le génome humain avec environ 80 gènes (Tamargo et al,
Cardiovasc. Res. 2004, 62 : 9-33). Ces canaux potassiques peuvent être
subdivisés en 3 sous-familles : les canaux activés par le potentiel ou voltage
(canaux Kv) et le calcium (canaux KCa) , les canaux à rectification entrante (Kir)
et les canaux potassiques à 2 pores (K2p) . La sous-famille des canaux activés
par le potentiel est la plus représentée dans l'organisme humain avec une
répartition quasi ubiquitaire dans les cellules excitables (cellules cardiaques,
neurones, cellules musculaires striées ou lisses) et les cellules non-excitables
comme les cellules pancréatiques, prostatiques, parathyroide etc. (pour revue,
Gutman G et al, Pharmacol. Rev. 2005, 57: 473-508).
La fonction principale des canaux potassiques Kv dans les cellules excitables
et le contrôle du potentiel de membrane de repos et de la durée du potentiel
d'action (Nerbonne et Kass, Physiol. Rev.2005 ;85 :1205-1 253). A ce titre
plusieurs canaux Kv interviennent dans ce contrôle tant au niveau des
oreillettes que des ventricules cardiaques. Les canaux Kv4.3 associés aux sous
unités KChIP 2 forment le courant lt0 qui intervient dans la phase de
repolarisation précoce du potentiel d'action (PA), les canaux KVLQT1/MinK et
hERG qui interviennent dans la phase tardive de repolarisation du PA (en
générant respectivement les courants lKs et lKr) Les canaux pré-cités sont
répartis uniformément entre les oreillettes et les ventricules cardiaques.
Cependant, deux autres types de canaux potassiques montrent une répartition
uniquement dans les oreillettes. Les canaux potassiques dépendant du
potentiel (Kv-1 .5) responsables du courant lKur et les canaux à rectification
entrante activés par l'acétylcholine (Kir3.1 et Kir3.4 responsable du courant lKAch)-
Des modifications de l'activité électrique membranaire sont observées dans
de nombreuses pathologies, notamment les pathologies cardiaques de troubles
du rythme. Parmi celles-ci, la fibrillation atriale (FA) est un trouble du rythme
grave qui correspond à une activité totalement désynchronisée des mycocytes
atriaux résultant en une activité électrique ininterrompue, rapide et irrégulière.
La FA est induite par l'apparition de circuits électriques de réentrée dans le
tissu atrial (Miyasaka Y et al, Circulation 2006, 114 : 119-125). Il n'existe pas à
ce jour de traitement anti-arythmique spécifique de l'étage atrial pour réduire
l'incidence de la FA ce qui constitue donc un besoin médical important (Page et
Roden, Nat. Rev. Drug Discov. 2005, 4 : 899-91 0).
La présence d'une multitude de circuits de micro-réentrée activés
simultanément explique le caractère anarchique de l'activité électrique
constatée aussi bien par voie endocavitaire que sur l'ECG. Ce trouble
rythmique se développe généralement sur un myocarde atrial pathologique au
plan électrophysiologique, dont les périodes réfractaires sont trop courtes et
très inégales entre elles, donc très vulnérables à la moindre extrasystole. Ces
anomalies s'inscrivent dans le cadre d'un phénomène de remodelage
myocardique, consécutif à une surcharge de pression ou à un étirement
provoquant des altérations morphologiques (hypertrophie, dilatation, fibrose)
ainsi que des modifications dans la régulation des courants ioniques
transmembranaires, modifiant les caractéristiques électrophysiologiques des
myocytes atriaux. Étant donné que chaque accès de FA entretient, voire
aggrave ce processus de remodelage mécanique et électrophysiologique, on
comprend alors que la FA possède un fort potentiel de récidive et que son
évolution naturelle se fasse vers la chronicité. À l'opposé, il a été identifié
récemment des FA de type focal, prenant leur origine en un point précis qui se
trouve presque toujours être une extension du myocarde atrial dans les veines
pulmonaires. Ces cas assez rares de FA prennent un caractère assez
monomorphe, en tout cas comparable aux extrasystoles atriales initiant l'accès
ou constatées de façon intermittente entre les crises. Dans tous les cas, la
perte de la systole atriale a pour conséquence une chute du débit cardiaque
variant entre 20 et 30 % et d'autant plus importante que celui-ci est diminué à
l'état basai. Parallèlement, l'existence d'une stase sanguine dans les cavités
atriales, notamment dans certains cul-de-sac tels que les auricules, rend
compte du risque thromboembolique. Toutefois, le risque embolique n'est que
partiellement conditionné par la seule présence de la FA, la stase atriale étant
aussi liée à l'augmentation des pressions intra cavitaires (dysfonction
ventriculaire gauche systolique ou diastolique, valvulopathie ou prothèse
valvulaire).
Le remodelage électrique constitue donc le substrat majeur de la genèse de
la FA, il résulte d'une diminution de l'activité des canaux calciques de type L
laissant les canaux potassiques Kv1 .5 exercer pleinement leur rôle repolarisant
au travers du courant potassique ultra rapide (Bhakta et Miller, Expert Opin.
Ther. Targets 2007, 11 : 1161 - 1 178). La conséquence est un raccourcissement
dramatique de la période réfractaire ce qui constitue le facteur déclenchant des
micro-réentrées. Sachant que les canaux potassiques Kv1 .5 ne sont pas
exprimés de façon fonctionnelle à l'étage ventriculaire, un bloqueur de ces
canaux constituera donc un anti-arythmique sélectif de l'étage atrial sans
affecter l'électrophysiologie ventriculaire. Son effet pharmacologique se traduit
par un allongement de la période réfractaire et donc une moindre incidence des
circuits de micro-réentrée. Un certain nombre de données expérimentales
obtenues avec des produits de référence confirment l'intérêt du blocage de
Kv1 .5 comme cible thérapeutique (Gôgelein et al, Naunyn Schmiedeberg's Arch
Pharmacol 2004, 370 : 183-192, Regan et al, J Pharmacol Exp Ther 2008, 324 :
322-330).
Les changements rapides du potentiel de membrane sont bien connus dans
les cellules excitables mais des variations lentes du potentiel sont observées
dans toutes les cellules et sont associées au contrôle du cycle cellulaire. Le
cycle cellulaire est un paramètre clé dans le comportement cellulaire qui doit
être régulé et coordonné pour le développement, la régénération tissulaire et la
prolifération cellulaire (Pardo, Physiology, 2004 ;19 :285-292 ; Blackistion et al,
Cell Cylce, 2009 ;8-21 : 3527-3536). D'une manière générale, le blocage des
canaux potassiques conduit à une diminution de la prolifération dans des
modèles physiologiques (comme dans les lymphocytes) et pathologiques
(cancer). Le rôle des canaux potassiques dans la régulation du cycle cellulaire
a été démontré dans de nombreux types cellulaires, qu'ils soient physiologiques
ou pathologiques (lignées ou tumeurs cancéreuses) provenant de mélanome
humain, le cancer des poumons, lymphome, mésotheliome, hépatocarcinome,
lymphocytes, monocytes (pour revue Pardo et al, J . Membr. Biol, 2005 ;205 :
5-124).
Comme utilisé précédemment, le terme « Kv » indique la famille des canaux
potassiques dépendant du potentiel et comprend différentes sous familles
(Kv , Kv2., Kv3. ... ) parmi lesquels on retrouve les canaux Kv1 . 1 , Kv1 .2,
Kv1 .3...
« Un bloqueur des canaux Kv » dénote une molécule qui réduit ou bloque le
flux des ions K+ au travers du canal.
Comme utilisé ici, le terme « sels » désigne les sels inorganiques d'addition
d'acides et de bases des composés de la présente invention. De préférence,
les sels sont pharmaceutiquement acceptables, c'est à dire qu'ils sont nontoxiques
pour le patient auquel ils sont administrés. Le terme
« pharmaceutiquement acceptable » se réfère à des entités moléculaires et des
compositions qui ne produisent aucun effet adverse, allergique ou autre
réaction indésirable quand elles sont administrées à un animal ou un humain.
Quand utilisé ici, le terme « excipient pharmaceutiquement acceptable » inclut
tout diluant, adjuvant ou excipient, tels que des agents préservatifs, des agents
de remplissage, des agents désintégrant, mouillant, émulsifiant, dispersant,
antibactérien ou antifongique, ou bien encore des agents qui permettraient de
retarder l'absorption et la résorption intestinale et digestive. L'utilisation de ces
milieux ou vecteurs est bien connue de l'art. Excepté si l'agent est
chimiquement incompatible avec un dérivé diarylpyndazinone, son utilisation
dans des compositions pharmaceutiques avec les composés selon l'invention
est envisagée. Dans le contexte de l'invention, le terme « traitement » , comme
utilisé ici, signifie empêcher ou inhiber la survenue ou la progression de
l'affection à laquelle le terme s'applique, ou bien d'un ou de plusieurs
symptômes de cette affection.
La présente invention a pour objet des dérivés de diarylpyridazinones
bloqueurs des canaux potassiques Kv (plus particulièrement les canaux Kv1 .5,
Kv4.3 et Kv1 1.1) et leur application en thérapeutique humaine.
Ces composés correspondent à la formule générale I :
dans laquelle
R et R2 représentent de manière simultanée ou indépendamment un ou
plusieurs groupements choisis parmi : halogène tel que F, Br, Cl, alkyle linéaire
ou branché en Ci-C 4, hydroxy, alkoxy linéaire ou branché en Ci-C 4, nitrile ou
arylsulfonamido dont l'aryl est éventuellement substitué par un groupement
alkyle linéaire ou branché en CrC 4,
ainsi que les différents énantiomères et leurs mélanges en toutes proportions,
et leurs sels pharmaceutiquement acceptables.
Dans le cadre de la présente invention, le groupe aryle désigne des
monocycles aromatiques hydrocarbonés de 5 ou 6 chaînons.
Selon un mode de réalisation de l'invention, les composés de formule
générale I sont ceux pour lesquels :
représente un groupement hydroxy, méthoxy ou cyano ;
R2 représente plusieurs groupements choisis parmi : halogène tel que F, Br, Cl
alkyle linéaire ou branché en CrC 4, hydroxy, alkoxy linéaire ou branché en C
C4, nitrile ;
ainsi que les différents énantiomères et leurs mélanges en toutes proportions,
et leurs sels pharmaceutiquement acceptables.
Selon un autre mode de réalisation de l'invention, les composés de formule
générale I sont ceux pour lesquels :
R représente un groupement hydroxy,
R2 représente plusieurs groupements choisis parmi : halogène tel que F, Cl,
alkyle linéaire ou branché en Ci-C 4, hydroxy, alkoxy linéaire ou branché en Ci-
C4, nitrile ;
ainsi que les différents énantiomères et leurs mélanges en toutes proportions,
et leurs sels pharmaceutiquement acceptables.
Selon un autre mode de réalisation de l'invention, les composés de formule
générale I sont ceux pour lesquels :
R i représente un groupement hydroxy situé en position para (position 4) sur le
phényl qu'il substitue,
R2 représente plusieurs groupements choisis parmi : Cl, méthyle, hydroxy,
méthoxy, nitrile,
ainsi que les différents énantiomères et leurs mélanges en toutes proportions,
et leurs sels pharmaceutiquement acceptables.
La présente invention concerne les composés de formule générale I
caractérisés en ce qu'ils sont choisis parmi :
1. 4,5-Bis-(4-hydroxy-phényl)-2-(1 -phényl-éthyl)-2H-pyridazin-3-one
2 . 4,5-Bis-(4-hydroxy-phényl)-2-((S)-1 -phényl-éthyl)-2H-pyridazin-3-one
3 . 4,5-Bis-(4-hydroxy-phényl)-2-((R)-1 -phényl-éthyl)-2H-pyridazin-3-one
4 . 2,2'-(6-oxo-1 -(1 -phényléthyl)-1 ,6-dihydropyridazine-4,5-diyl)dibenzonitrile
5 . 3,3'-(6-oxo-1 -(1 -phényléthyl)-1 ,6-dihydropyridazine-4,5-diyl)dibenzonitrile
6 . 4,5-Bis-(4-méthoxy-phényl)-2-(1 -phényl-éthyl)-2H-pyridazin-3-one
7 . N,N'-(3,3'-(6-oxo-1 -(1 -phényléthyl)-1 ,6-dihydropyndazine-4,5-diyl)bis(3,1 -
pheylee))bis(4-méthylbenzenesulfonamide)
8 . 3-(5-(4-méthoxyphényl)-6-oxo-1 -(1 -phényléthyl)-1 ,6-dihydropyridazin-4-
yl)benzonitrile
9 . 2-[5-(4-Méthoxy-phényl)-6-oxo-1 -(1 -phényl-éthyl)-1 ,6-dihydro-pyridazin-
4-yl]-benzonitrile
10 . N-{3-[5-(3,4-Diméthyl-phényl)-6-oxo-1 -(1 -phényl-éthyl)-1 ,6-dihydropyridazin-
4-yl]-phényl}-4-méthyl-benzenesulfonamide
11.4,5-Bis-(3,4-dichloro-phényl)-2-(1 -phényl-éthyl)-2H-pyridazin-3-one
La présente invention s'étend aussi aux différents énantiomères des
composés de formule générale I , ainsi que leurs mélanges en toutes
proportions.
Les mélanges des énantiomères en toutes proportions incluent également
les mélanges racémiques.
L'objet de l'invention concerne également les différents énantiomères et
leurs mélanges en toutes proportions des composés de formule générale I ainsi
que les sels pharmaceutiquement acceptables.
La présente invention s'étend également aux procédés de préparation
chimique des composés de formule générale I ainsi que les différents
énantiomères et leurs mélanges en toutes proportions.
La préparation des deux énantiomères peut être réalisée de manière
énantiosélective à partir respectivement des (R) ou (S)-l -phényléthanols. Par
ailleurs, à partir du racémique il est possible d'obtenir les deux énantiomères
par séparation par HPLC préparative sur colonne chirale (par exemple
Chiralpack AD-H, éluent : heptane/EtOH/diéthylamine).
La présente invention concerne également les composés de formule
générale I ainsi que les différents énantiomères et leurs mélanges en toutes
proportions, et leurs sels pharmaceutiquement acceptables pour leur utilisation
en tant que bloqueurs de canaux potassiques Kv et plus particulièrement les
canaux Kv1 .5, Kv4.3 et Kv1 1. 1 .
La présente invention concerne également les composés de formule
générale I ainsi que les différents énantiomères et leurs mélanges en toutes
proportions, et leurs sels pharmaceutiquement acceptables pour leur utilisation
en tant que médicament.
L'invention concerne aussi les composés de formule générale I ainsi que les
différents énantiomères et leurs mélanges en toutes proportions, et leurs sels
pharmaceutiquement acceptables pour leur utilisation en tant que médicament
destiné au traitement et/ou la prévention des maladies nécessitant des
bloqueurs de canaux potassiques Kv et plus particulièrement les canaux Kv1 .5,
Kv4.3 et Kv1 . 1 .
L'invention concerne aussi les composés de formule générale I ainsi que les
différents énantiomères et leurs mélanges en toutes proportions, et leurs sels
pharmaceutiquement acceptables pour leur utilisation en tant que médicament
destiné au traitement et/ou la prévention des maladies telles que la fibrillation
atriale et les troubles du rythme cardiaques des oreillettes et/ou des ventricules
mais également des pathologies dans lesquelles le cycle cellulaire, la
prolifération cellulaire et la regénération sont modifiés (cancer, inflammation
chronique).
L'invention s'étend également aux compositions caractérisées en ce qu'elles
contiennent à titre de principe actif un composé de formule générale I ou l'un de
ses énantiomères et leurs mélanges en toutes proportions, ou l'un de ses sels
pharmaceutiquement acceptable.
L'invention concerne également une composition pharmaceutique
caractérisée en ce qu'elle contient un composé de formule générale I ou l'un de
ses énantiomères et leurs mélanges en toutes proportions, ou l'un de ses sels
pharmaceutiquement acceptable en association avec tout excipient
pharmaceutiquement acceptable.
Les compositions pharmaceutiques selon l'invention peuvent être
administrées par voie orale, sublinguale, sous-cutanée, intramusculaire,
intraveineuse, transdermique, locale ou rectale. Dans ce cas l'ingrédient actif
peut être administré sous formes unitaires d'administration, en mélange avec
des supports pharmaceutiques classiques, aux animaux ou aux êtres humains.
Les formes unitaires d'administration appropriées comprennent les formes par
voie orale telles que les comprimés, les gélules, les poudres, les granules et les
solutions ou suspensions orales, les formes d'administration sublinguale et
buccale, les formes d'administration sous-cutanée, topique, intramusculaire,
intraveineuse, intra-nasale ou intraoculaires et les formes d'administration
rectale. Les formulations appropriées pour la forme d'administration choisie
sont connues par l'homme du métier et décrites, par exemple dans :
Remington, The science and Practice of Pharmacy, i 9eme édition, 1995, Mack
Publishing Company.
Les dosages des composés de formule I dans les compositions de l'invention
peuvent être ajustés afin d'obtenir une quantité de substance active qui est
efficace pour obtenir la réponse thérapeutique désirée pour une composition
particulière à la méthode d'administration. La dose efficace d'un composé de
l'invention varie en fonction de nombreux paramètres tels que, par exemple, la
voie d'administration choisie, le poids, l'âge, le sexe, la nature de la pathologie
et la sensibilité de l'individu à traiter. En conséquence, la posologie optimale
devra être déterminée en fonction des paramètres jugés pertinents, par le
spécialiste en la matière.
SYNTHESE
Les composés de la présente invention peuvent être synthétisés en utilisant
les voies de synthèse décrites ci-dessous ou en utilisant des méthodes de
synthèse connues de l'homme de métier.
Cette méthode de synthèse des composés de formule générale I (schéma 1)
est caractérisée en ce que l'on condense une dibromo ou dichloro pyridazinone
de formule générale I I pour lequel X représente soit un atome chlore ou un
atome de brome,
avec un dérivé de formule générale III,
pour lequel
- lorsque A représente un atome d'halogène tel qu'un atome chlore ou un
atome de brome, on utilise une base telle que CS2CO3 dans un solvant tel que
le diméthylformamide.
- lorsque A représente OH, on utilise des conditions de couplage de
Mitsunobu telles qu'en présence de diéthylazodicarboxylate d'éthyle et de
triphénylphosphine dans un solvant tel que le THF. Ces conditions sont en
particulier applicables à la synthèse énantiosélective des composés de formule
générale I à partir du (R) ou (S)-l -phényléthanol.
L'intermédiaire IV obtenu
est alors couplé (étape 1) avec un dérivé du bore V
pour lequel R 1 est tel que défini dans la formule générale I et U représente
dans un mélange de solvants tel que toluène/éthanol ou eau/acétonitrile ou
dioxane/eau en présence d'une base telle que le carbonate de sodium ou de
potassium et d'un catalyseur tel que le tétrakis(triphénylphosphine)palladium ou
PdCI2/2PPh 3.
Ces conditions opératoires conduisent majoritairement à la formation du
composé V I et minoritairement à la formation du composé VII.
L'intermédiaire VI est alors remis en réaction (étape 2) :
- soit avec le dérivé du bore V dans les conditions de couplage décrites
précédemment pour conduire à la formation du composé VII.
- soit avec le dérivé du bore VIII
pour lequel R2 est tel que défini dans la formule générale I et U est tel que défini
précédemment dans les conditions de couplage décrites précédemment pour
l'étape 1 pour conduire à la formation du composé IX.
Etape 2
R1 différent de R2
Schéma 1
Les composés intermédiaires et finaux peuvent être, si on le désire, purifiés
suivant une ou plusieurs méthodes de purification choisies parmi, l'extraction, la
filtration, la chromatographie sur gel de silice, l'HPLC préparative sur phase
normale ou inverse ou chirale, la cristallisation.
Les matières premières utilisées dans les procédés décrits précédemment
sont commerciales ou aisément accessibles à l'homme de métier selon des
procédés décrits dans la littérature.
Les exemples suivants illustrent l'invention sans en limiter la portée.
Les analyses élémentaires et les spectres de masse et RMN confirment les
structures des composés.
EXEMPLES
A) INTERMEDIAIRES
Intermédiaires 1:
a) 4,5-dichloro-2-( 1-phényléthyl)pyridazin-3(2H)-one (1a)
La 4,5-dichloropyridazin-3(2H)-one (20g, 121mmol) est placée en présence de 1-
bromoéthyl)benzene (33,7g, 182mmol) et de carbonate de césium (47,4g, 145mmol)
dans lOOmL de DMF à température ambiante pendant 4h. Après concentration à sec, le
résidu est repris par l'eau et extrait à l'acétate d'éthyle. Les phases organiques sont
séchées puis concentrées à sec. Le résidu obtenu est purifié par chromatographie flash
sur silice (Ether de pétrole-AcOEt: 95-5). 31g d'huile claire sont obtenus (rendement
95%). CCMgelde silice 60 F 254 Merck, Ether de pétrole-AcOEt: 90-10, Rf=0,50.
b) 4,5-Dichloro-2-((S)-1 -phényl-éthyl)-2H-pyridazin-3-one ( 1b)
La 4,5-dichloropyridazin-3(2H)-one ( 1 ,35g, 8,2mmol) est placée dans 30mL
de THF en présence de (R)-l -phényléthanol ( 1g , 8,2mmol) et de
triphénylphosphine (2,1 5g, 8,2mmol) auxquels est ajouté du
diéthylazodicarboxylate d'éthyle ( 1 ,71 g , 9,82mmol. Le milieu réactionnel est
agité une nuit à température ambiante puis concentré à sec. Le résidu est repris
par l'eau et extrait au dichlorométhane sur colonne SPE (terres de diatomées).
Les phases organiques sont concentrées à sec et le résidu obtenu est par
chromatographie flash sur silice (CH2CI2) . 2,1 g d'huile jaune sont isolés
(rendement 80%). CCM gel de silice 60 F 254 Merck, CH CI -MeOH:95-5,
Rf=0,66.
c) 4,5-Dichloro-2-((R)-1 -phényl-éthyl)-2H-pyridazin-3-one ( 1c)
L'intermédiaire 1c (huile) est préparé à partir de (S)-l -phényléthanol selon le
mode opératoire décrit pour l'intermédiaire 1b (77%). CCM gel de silice 60 F
254 Merck, CH2CI2-MeOH:90-10, Rf=0,82.
B) COMPOSES SELON L'INVENTION
Exemple 1 : 4,5-Bis-(4-hydroxy-phényl)-2-(1-phényl-éthyl)-2H-pyridazin-3-one (1)
Le composé 1 est préparé selon la méthode de synthèse suivante :
Etape 1 : l'intermédiaire 1a (8,7g, 32,3mmol) est placé en présence de
tétrakis(triphénylphosphine)palladium(0) ( 1 ,12g, 0,97mmol) et de carbonate de
sodium (6,85g, 64,7mmol) dans un mélange de 50mL de toluène et 50 mL
d'éthanol et le mélange porté à 80°C. 1,2 équivalent d'acide 4-
hydroxyphénylboronique sont additionnés et le mélange est porté à reflux
pendant 5h puis 1,2 équivalent supplémentaire d'acide 4-
hydroxyphénylboronique est additionné et le reflux est maintenu toute la nuit.
Après concentration à sec, le résidu est repris à l'eau et extrait à l'AcOEt. Après
séchage des phases organiques et concentration à sec, le résidu obtenu est
purifié par chromatographie flash (CH2CI2-MeOH, gradient 100-0 à 97-3 sur 40
min). 0,7g de composé 1 minoritaire est obtenu et 8,2g de solide correspondant
au produit mono substitué 4-chloro-5-(4-hydroxyphényl)-2-(1 -phényléthyl)-
pyridazin-3(2H)-one majoritaire est obtenu (rendement:78%).
Etape 2 : Ce produit mono substitué est remis en réaction dans les
conditions décrites pour l'étape 1 (2,4 équivalents d'acide 4-
hydroxyphénylboronique, reflux 1 nuit). Après traitement du milieu réactionnel,
le résidu obtenu est purifié par chromatographie flash (CH2Cl2-MeOH, gradient
100-0 à 98-2 sur 20 min). Le résidu est trituré dans un mélange diéthyléther-
CH2Cl2-MeOH : 40-5-2 et le composé 1 (solide) obtenu est isolé par filtration
(7,2g, rendement 78%).
CCM gel de silice 60 F 254 Merck, CH2CI2-MeOH : 95-5, Rf=0,35.
F=160°C
RMN H (DMSO-d6) ppm: 9,56 (m, 2H), 8,02 (s, 1H), 7,39 (m, 5H), 6,96 (m,
4H), 6,63 (m, 4H), 6,24 (m,1 H), 1,72 (d, 3H).
MS (+ESI) m/z 385 (MH+)
Exemple 2 : 4,5-Bis-(4-hydroxy-phényl)-2-((S)-1 -phényl-éthyl)-2H-pyridazin-
3-one (2)
Le composé 2 est préparé selon la méthode de synthèse décrite pour
l'exemple 1 à partir de l'intermédiaire 1c (rendement :85%).
CCM gel de silice 60 F 254 Merck, CH2CI2-MeOH : 90-1 0 , Rf=0,60.
F=168°C
RMN H (DMSO-d6) ppm: 9,70 (s, 1H), 9,54 (s, 1H), 8,02 (s, 1H), 7,39 (m, 5H),
6,97 (m, 4H), 6,63 (m, 4H), 6,24 (m,1 H), 1,72 (d, 3H).
MS (+ESI) m/z 385 (MH+)
Caic (MeOH)= -256.5°
HPLC chirale : colonne Chiralpack AD-H 250*4,6mm DAI, éluant ( 1ml_/min):
heptane /EtOH/diéthylamine : 80/20/0,1 , temps de rétention :8,92min.
Exemple 3 : 4,5-Bis-(4-hydroxy-phényl)-2-((R)-1 -phényl-éthyl)-2H-pyridazin-
3-one (3)
Le composé 3 est préparé selon la méthode de synthèse décrite pour
l'exemple 1 à partir de l'intermédiaire 1b (rendement :43%).
CCM gel de silice 60 F 254 Merck, CH2CI2-MeOH : 90-1 0 , Rf=0,60.
F=222°C
RMN H (DMSO-d6) ppm: 9,70 (s, 1H), 9,54 (s, 1H), 8,02 (s, 1H), 7,39 (m, 5H),
6,97 (m, 4H), 6,63 (m, 4H), 6,24 (m,1 H), 1,72 (d, 3H).
MS (+ESI) m/z 385 (MH+)
Qcaïc (MeOH)= 272,2°
HPLC chirale : colonne Chiralpack AD-H 250*4,6mm DAI, éluant ( 1mL/min):
heptane /EtOH/ diéthylamine : 80/20/0,1 , temps de rétention :7,23min.
Exemple 4 : 2,2'-(6-oxo-1 -(1 -phényléthyl)-1 ,6-dihydropyridazine-4,5-
diyl)dibenzonitrile (4)
Le composé 4 est préparé à partir de l'intermédiaire 1a et du 2-(4, 4,5,5-
tetraméthyl-1 ,3,2-dioxaborolan-2-yl)benzonitrile selon l'étape 1 de la méthode
de synthèse en utilisant PdCl2/2PPh 3, Na2C03 et un mélange eau/acétonitrile :
1/1 . Le produit minoritaire formé correspond au composé 4 (rendement :3,4%).
CCM gel de silice 60 F 254 Merck, CH2CI2, Rf=0,23.
F=200°C
RMN H (DMS0-d6) ppm: 8,1 9 (s, H), 7,80 (d, 2H), 7,75 (d, 2H), 7,36 (m, 9H),
6,27 (q, H), 1,76 (d, 3H).
MS (+ESI) m/z 403 (MH+)
Exemple 5 : 3,3'-(6-oxo-1 -(1 -phényléthyl)-1 ,6-dihydropyridazine-4,5-
diyl)dibenzonitrile (5)
Le composé 5 est préparé à partir de l'intermédiaire 1a et de l'acide 3-
cyanophénylboronique dans les conditions décrites pour l'exemple 4 . Le produit
minoritaire formé (solide) correspond au composé 4 (rendement :7,4%).
CCM gel de silice 60 F 254 Merck, CH2CI2, Rf=0,1 1.
F=202°C
RMN H (DMSO-d6) ppm: 8,23 (s, 1H), 7,78 (m, 3H), 7,72 (s, 1H), 7,40 (m, 9H),
6,28 (q, 1H), 1,77 (d, 3H).
MS (+ESI) m/z 403 (MH+)
Exemple 6 : 4,5-Bis-(4-méthoxy-phényl)-2-(1 -phényl-éthyl)-2H-pyridazin-3-
one (6)
Le composé 6 est préparé à partir de l'intermédiaire 1a et de l'acide 4-
méthoxyphénylboronique dans les conditions décrites pour l'exemple 1 en
utilisant le tétrakis(triphénylphosphine)palladium(0), K2CÛ3 et un mélange
dioxane/eau: 3/1 . Le composé 6 est isolé sous forme de solide
(rendement :71 %).
CCM gel de silice 60 F 254 Merck, Ether de pétrole-AcOEt:80-20, Rf=0,20.
RMN H (CDCIs) ppm: 7,88 (s, 1H), 7,53 (d, 2H), 7,37-7,31 (m, 2H), 7,30-7,26
(m, 1H), 7,14-7,1 3 (d, 2H), 7,06-7,02 (d, 2H), 6,80-6,75 (m, 4H), 6,47-6,40 (m,
1H), 3,78 (s, 3H), 3,77 (s, 3H), 1,83 (s, 3H).
MS (+ESI) m/z 4 13 (MH+)
Exemple 7 : N,N'-(3,3'-(6-oxo-1 -(1 -phényléthyl)-1 ,6-dihydropyridazine-
4,5-diyl)bis(3,1 -phénylene))bis(4-méthylbenzenesulfonamide) (7)
Le composé 7 est préparé à partir de l'intermédiaire 1a et du 4-méthyl-N-(3-
(4,4,5,5-tetraméthyl-1 ,3,2-dioxaborolan-2-yl)phényl)benzenesulfonamide dans
les conditions décrites pour l'exemple 6 . Le composé 7 est isolé sous forme de
solide (rendement :74%).
CCM gel de silice 60 F 254 Merck, Ether de pétrole-AcOEt:50-50, Rf=0,46.
F=202°C
RMN H (DMSO) ppm: 10,26 (s, 1H), 10,14 (s, 1H), 7,92 (s, 1H), 7,53 (d, 4H),
7,42-7,25 (m, 9H), 7,08-6,88 (m, 6H), 6,52 (dd, 2H), 6,26-6,1 8 (m, 1H), 2,31 (s,
6H), 1,74 (d, 3H).
MS (+ESI) m/z 691 (MH+)
Exemple 8 : 3-(5-(4-méthoxyphényl)-6-oxo-1 -(1 -phényléthyl)-1 ,6-
dihydropyridazin-4-yl)benzonitrile (8)
Le composé 8 est préparé à partir de l'intermédiaire 1a et de l'acide 3-
cyanophénylboronique selon l'étape 1 de la méthode de synthèse en utilisant
PdCl2/2PPh 3, Na2C03 et un mélange eau/acétonitrile : 1/1 . Le produit majoritaire
formé ( 1 ,96g, 3-(5-chloro-6-oxo-1 -(1 -phényléthyl)-1 ,6-dihydropyridazin-4-
yl)benzonitrile, rendement : 19%) est isolé puis engagé dans l'étape 2 de la
méthode de synthèse en utilisant l'acide 4-méthoxyphénylboronique avec le
tètrakis(triphénylphosphine)palladium(0), K2CO3 et un mélange dioxane/eau:
2/1 . Le composé 8 est isolé sous forme de solide (rendement :62%).
CCM gel de silice 60 F 254 Merck, Ether de pétrole-AcOEt:50-50, Rf=0,53.
F=1 98°C
CCM gel de silice 60 F 254 Merck, Ether de pétrole-AcOEt: 50-50, Rf=0,53.
RMN H (DMSO-d6) ppm: 8,1 3 (s, 1H), 7,77 (m, 2H), 7,38 (m, 7H), 7,09 (d, 2H),
6,81 (d, 2H), 6,28 (q, 1H), 3,71 (s, 3H), 1,75 (d, 3H).
MS (+ESI) m/z 408 (MH+)
Exemple 9 : 2-[5-(4-Méthoxy-phényl)-6-oxo-1 -(1 -phényl-éthyl)-1 ,6-dihydropyridazin-
4-yl]-benzonitrile (9)
Le composé 9 est préparé à partir de l'intermédiaire 1a et du 2-(4, 4,5,5-
tetraméthyl-1 ,3,2-dioxaborolan-2-yl)benzonitrile selon l'étape 1 de la méthode
de synthèse en utilisant PdCI2/2PPh 3, Na2C0 3 et un mélange eau/acétonitrile :
1/1 . Le produit majoritaire formé ( 1 ,5g, 2-(5-chloro-6-oxo-1 -(1 -phényléthyl)-1 ,6-
dihydropyridazin-4-yl)benzonitrile, rendement : 16%) est isolé puis engagé dans
l'étape 2 de la méthode de synthèse avec l'acide 4-méthoxyphénylboronique en
utilisant le tètrakis(triphénylphosphine)palladium(0), K2C0 3 et un mélange
dioxane/eau: 2/1 . Le composé 9 est isolé sous forme de solide
(rendement :71 %).
CCM gel de silice 60 F 254 Merck, Ether de pétrole-AcOEt:70-30, Rf=0,45.
F=1 76°C
CCM gel de silice 60 F 254 Merck, Ether de pétrole-AcOEt: 50-50, Rf=0,53.
RMN H (DMSO-d6) ppm: 8,09 (s, 1H), 7,79 (d, 2H), 7,40 (m, 7H), 7,08 (d, 2H),
6,81 (d, 2H), 6,28 (q, 1H), 3,71 (s, 3H), 1,75 (d, 3H).
MS (+ESI) m/z 408 (MH+)
Exemple 10 : N-{3-[5-(3,4-Diméthyl-phényl)-6-oxo-1 -(1 -phényl-éthyl)-1 ,6-
dihydro-pyridazin-4-yl]-phényl}-4-méthyl-benzenesulfonamide (10)
Le composé 10 est prépar partir de l'intermédiaire 1a et du 4-méthyl-N-
(4-(4,4,5,5-tetraméthyl-1 ,3,2-dioxaborolan-2-yl)phényl)benzenesulfonamide
selon l'étape 1 de la méthode de synthèse en utilisant PdCl2/2PPh 3, Na2C0 3 et
un mélange eau/acétonitrile : 1/1 . Le produit majoritaire formé (-N-(3-(5-chloro-
6-OXO-1 -(5g, 1-phényléthyl)-1 ,6-dihydropyridazin-4-yl)phényl)-4-méthylbenzenesulfonamide,
rendement : 62%) est isolé puis engagé dans l'étape 2 de la
méthode de synthèse avec l'acide 3,4-diméthylphénylboronique en utilisant le
tétrakis(triphènylphosphine)palladium(0), K2C0 3 et un mélange dioxane/eau:
2/1 . Le composé 10 est isolé sous forme de solide (rendement :67%).
CCM gel de silice 60 F 254 Merck, CH2CI2-MeOH:97,5-2,5, Rf=0,65.
RMN H (DMSO) ppm: 10,24 (s, 1H), 7,92 (s, 1H), 7,54 (d, 2H), 7,41 -7,26 (m,
7H), 7,1 0 (t, 1H), 7,04 (s, 1H), 6,96-6,91 (m, 2H), 6,88 (d, 1H), 6,72 (d, 1H),
6,62 (d, 1H), 6,27-6,20 (m, 1H), 2,34 (s, 3H), 2,1 5 (s, 3H), 2,06 (s, 3H), 1,73 (d,
3H).
MS (+ESI) m/z 550 (MH+)
Exemple 11 : 4,5-Bis-(3,4-dichloro-phényl)-2-(1 -phényl-éthyl)-2H-pyridazin-
3-one ( 1 1)
Le composé 11 est préparé à partir de l'intermédiaire 1a et de l'acide 3,4-
dichlorophénylboronique dans les conditions décrites pour l'exemple 1 en
utilisant le tétrakis(triphénylphosphine)palladium(0), K2CO3 et un mélange
dioxane/eau: 7/3. Le composé 12 est isolé sous forme de solide
(rendement :54%).
F=92°C
CCM gel de silice 60 F 254 Merck, Ether de pétrole-AcOEt:80-20, Rf=0,54.
RMN H (DMSO) ppm: 8,1 9 (s, 1H), 7,64 (d, 1H), 7,61 -7,57 (m, 2H), 7,54 (d,
H), 7,44-7,26 (m, 5H), 7,13 (dd, 1H), 7,07 (dd, 1H), 6,30-6,22 (m, 1H), 1,75 (d,
3H)
MS (+ESI) m/z 491 (MH+)
C EVALUATION PHARMACOLOGIQUE
L'évaluation pharmacologique des composés sur le canal potassique Kv1 .5
a été réalisée en plaque 96 puits en technologie FLIPR par la mesure d'ion
thallium.
Les cellules HEK293, transfectées de manière stable avec l'isoforme
humaine des canaux Kv1 .5, sont ensemencées 24h avant l'expérimentation
dans des plaques 96 puits ( 15 106 cellules /plaque, 200 m I / puit) polylysinées
dans le milieu de culture suivant : DMEM, 10% SVF, Pénicilline/Streptomycine,
G418 en tant qu'antibiotique de sélection.
L'expérimentation en FLIPR est réalisée à l'aide du « FLIPR Potassium Ion
Channel Assay Kit) comme indiquée par le manufacturier (Molecular Devices).
Brièvement, Le milieu de culture est remplacé par la solution contenant le
marqueur de thallium pendant 90min à 37°C. A l'issue de cette étape, les
composés à tester sont ajoutés à une concentration finale de 10 mM dans le
puits pendant 15 min à 37 °C. La fluorescence de base est alors lue pendant
60 sec. L'addition d'un milieu dépolarisant (20 mM de potassium et 3 mM de
thallium final), ouvre les canaux potassiques et induit une augmentation de la
fluorescence du fluorophore thallium correspondant à un influx d'ions thallium
au travers des canaux hKv1 .5. La mesure est réalisée 30 sec après l'injection
de la solution dépolarisante. L'application de 10 mM DPO (Tocris, bloqueur des
canaux Kv1 .5) permet de normaliser la fluorescence.
Tableau 1
BMS3941 36 est un bloqueur du cana Kv1 .5 en développement chez Bristol-
Myers Squibb (Abstract, D. Xing et al. Circulation 2009, 120 (18S3): 2515).
Les résultats obtenus montrent que les composés de formule générale (I)
bloquent le canal Kv1 .5
Les composés de formule générale (I) peuvent être utilisés en tant que
bloqueurs du canal Kv1 .5.
Ό)ABREVIATIONS
CCM Chromatographie sur Couche Mince
DMF Diméthylformamide
DMSO Diméthylsulfoxyde
DPO (2-isopropyl-5-méthyl-cyclohexyl) diphénylphosphine oxide
HPLC Chromatographie liquide haute performance
Rf Rapport frontal
RMN Résonance magnétique nucléaire
THF Tétrahydrofurane
REVENDICATIONS
1) Composés de formule générale I :
dans laquelle
R-i et R2 représentent de manière simultanée ou indépendamment un ou
plusieurs groupements choisis parmi : halogène tel que F, Br, Cl, alkyle linéaire
ou branché en Ci-C 4, hydroxy, alkoxy linéaire ou branché en Ci-C 4, nitrile ou
arylsulfonamido dont l'aryl est éventuellement substitué par un groupement
alkyle linéaire ou branché en CrC 4,
ainsi que les différents énantiomères et leurs mélanges en toutes proportions,
et leurs sels pharmaceutiquement acceptables.
2) Composés de formule générale I selon la revendication 1) caractérisés
en ce que
R i représente un groupement hydroxy, méthoxy ou cyano ;
R2 représente plusieurs groupements choisis parmi : halogène tel que F, Br, Cl,
alkyle linéaire ou branché en Ci-C 4, hydroxy, alkoxy linéaire ou branché en Ci-
C4, nitrile ;
ainsi que les différents énantiomères et leurs mélanges en toutes proportions,
et leurs sels pharmaceutiquement acceptables.
3) Composés de formule générale I selon l'une des revendications 1)
caractérisés en ce que :
R représente un groupement hydroxy ;
R2 représente plusieurs groupements choisis parmi : halogène tel que F, Cl,
alkyle linéaire ou branché en Ci-C 4, hydroxy, alkoxy linéaire ou branché en Ci-
C4, nitrile ;
ainsi que les différents énantiomères et leurs mélanges en toutes proportions,
et leurs sels pharmaceutiquement acceptables.
4) Composés de formule générale I selon l'une des revendications 1) à 3)
caractérisés en ce que
R i représente un groupement hydroxy situé en position para (position 4) sur le
phényl qu'il substitue ;
R2 représente plusieurs groupements choisis parmi : Cl, méthyle, hydroxy,
méthoxy, nitrile ;
ainsi que les différents énantiomères et leurs mélanges en toutes proportions,
et leurs sels pharmaceutiquement acceptables.
5) Composés de formule générale I selon l'une des revendications
revendication 1) à 4) caractérisés en ce qu'ils sont choisis parmi :
1. 4,5-Bis-(4-hydroxy-phényl)-2-(1 -phényl-éthyl)-2H-pyridazin-3-one
2 . 4,5-Bis-(4-hydroxy-phényl)-2-((S)-1 -phényl-éthyl)-2H-pyridazin-3-one
3 . 4,5-Bis-(4-hydroxy-phényl)-2-((R)-1 -phényl-éthyl)-2H-pyridazin-3-one
4 . 2,2'-(6- oco - 1-(1 -phényléthyl)-1 ,6-dihydropyridazine-4,5-diyl)dibenzonitrile
5 . 3,3'-(6-oxo-1 -(1 -phényléthyl)-1 ,6-dihydropyridazine-4,5-diyl)dibenzonitrile
6 . 4,5-Bis-(4-méthoxy-phényl)-2-(1 -phényl-éthyl)-2H-pyndazin-3-one
7 . N,N'-(3,3'-(6-oxo-1 -(1 -phényléthyl)-1 ,6-dihydropyndazine-4,5-diyl)bis(3,1 -
pheylee))bis(4-méthylbenzenesulfonamide)
8 . 3-(5-(4-méthoxyphényl)-6-oxo-1 -(1 -phényléthyl)-1 ,6-dihydropyridazin-4-yl)-
benzonitrile
9 . 2-[5-(4-Méthoxy-phényl)-6-oxo-1 -(1 -phényl-éthyl)-1 ,6-dihydro-pyridazin-4-
yl]-benzonitrile
10 . N-{3-[5-(3,4-Diméthyl-phényl)-6-oxo-1 -(1 -phényl-éthyl)-1 ,6-dihydropyridazin-
4-yl]-phényl}-4-méthyl-benzenesulfonamide
11.4,5-Bis-(3,4-dichloro-phényl)-2-(1 -phényl-éthyl)-2H-pyridazin-3-one
6) Procédé de préparation des composés chimiques de formule générale I
selon l'une des revendications 1) à 5) caractérisé en ce que l'on condense une
dibromo ou dichloro pyridazinone de formule générale I I pour lequel X
représente soit un atome chlore ou un atome de brome,
avec un dérivé de formule générale III,
pour lequel :
- lorsque A représente un atome d'halogène tel qu'un atome chlore ou
un atome de brome, on utilise une base telle que Cs2C0 3 dans un solvant tel
que le diméthylformamide.
- lorsque A représente OH, on utilise des conditions de couplage de
Mitsunobu telles qu'en présence de diéthylazodicarboxylate d'éthyle et de
triphénylphosphine dans un solvant tel que le THF ;
l'intermédiaire IV obtenu
est alors couplé (étape 1) avec un dérivé du bore V
pour lequel R 1 est tel que défini dans la formule générale I et U représente
dans un mélange de solvants tel que toluène/éthanol ou eau/acétonitrile ou
dioxane/eau en présence d'une base telle que le carbonate de sodium ou de
potassium et d'un catalyseur tel que le tétrakis(triphénylphosphine)palladium ou
PdCI2/2PPh 3 ;
en ce que l'on obtient majoritairement la formation du composé VI et
minoritairement à la formation du composé VII ;
l'intermédiaire VI étant alors remis en réaction (étape 2) :
- soit avec le dérivé du bore V dans les conditions de couplage
décrites précédemment pour conduire à la formation du composé VII
R1=R2
- soit avec le dérivé du bore VIII
VIII
pour lequel R2 est tel que défini dans la formule générale I et U est tel que défini
précédemment dans les conditions de couplage décrites précédemment pour
l'étape 1 pour conduire à la formation du composé IX .
R1 différent de R2
7) Composés de formule générale I tels que définis selon l'une des
revendications 1) à 5) pour leur utilisation en tant que médicament.
8) Composés selon la revendication 7 pour leur utilisation en tant que
bloqueurs de canaux potassiques et plus particulièrement les canaux Kv1 .5,
Kv4.3 et Kv1 . 1 .
9) Composés selon la revendication 7 pour leur utilisation en tant que
médicament destiné au traitement et/ou la prévention des maladies nécessitant
des bloqueurs de canaux potassiques plus particulièrement les canaux Kv1 .5,
Kv4.3 et Kv1 . 1 .
10) Composés selon la revendication 7 pour leur utilisation dans le
traitement et/ou à la prévention de la fibrillation atriale, des troubles du rythme
cardiaque des oreillettes et/ou des ventricules, et des pathologies dans
lesquelles le cycle cellulaire et/ou la prolifération cellulaire et/ou la régénération
sont altérés tels que le cancer ou l'inflammation chronique.
11) Composition pharmaceutique comprenant un composé de formule
générale I selon l'une quelconque des revendications 1) à 5) en association
avec au moins un excipient pharmaceutiquement acceptable.